ABSTRACT Background: Human immunodeficiency virus (HIV) drug resistance is a major cause of treatment failure in children and adolescents infected with the virus. Objectives: The objectives of the study are to investigate HIV drug resistance (HIVDR) in patients who attended a referral care center in Argentina over a 15-year period and to compare mutational patterns between HIV-1 pol sequences characterized as B or BF recombinants. Methods: Individual resistance-associated mutations (RAMs) (to protease and reverse transcriptase inhibitors) were identified according to IAS-USA guidelines in 374 HIV-1-infected children and adolescents. HIV-1 subtype was characterized by phylogenetic and recombination analysis using MEGA5.1 and Simplot. Poisson linear regression was used to model the dynamics of the RAMs over time. Results: The prevalence of RAMs to protease inhibitors (R2 = 0.52, p = 0.0012) and nucleoside reverse transcriptase inhibitors (R2 = 0.30, p = 0.0225) decreased over time. HIVDR to non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors remained moderate to high, ranging between 33% and 76%. BF recombinants showed a higher frequency of thymidine analog mutation 1 RAMs profile and I54V mutation. Conclusion: In Argentina, HIVDR observed in children and adolescents has decreased over the past 15 years, regardless of the viral subtype.

Resumen Diferentes informes han demostrado que los ninos alcanzan niveles de carga viral (CV) de SARS-CoV-2 similares a los de los adultos, pero el impacto de la CV en los niños continua siendo incierto cuando se compara entre aquellos que son asintomáticos y sintomáticos. El objetivo de este estudio fue evaluar la CV al momento del diagnóstico en ninos asintomáticos y sintomáticos infectados por SARS-CoV-2. El análisis de CV se realizó retrospectivamente a partir de muestras de hisopados nasofaríngeos de 82 niños infectados por SARS-CoV-2 entre marzo y octubre de 2020. De ellos, 31 eran asintomáticos. Encontramos que el grupo sintomático tenía valores de CV significativamente más altos en comparación con el grupo asintomático (mediana = 7,41 vs. 4,35 log10 copias/ml, respectivamente). No obstante, 8 de los 31 ninos asintomáticos presentaron valores de CV elevados, equivalentes a los observados por encima del primer cuartil del grupo sintomático. El análisis por grupos de edad reveló que la mediana de CV fue más alta en los niños sintomáticos, aunque esta diferencia fue significativa solamente en los menores de 5 anos. A su vez, los valores de CV obtenidos a partir de los 82 niños infectados por SARS-CoV-2 no mostraron diferencias significativas según el grupo etario, el sexo, la enfermedad de base, los síntomas y la gravedad de la COVID-19. Este estudio enfatiza la necesidad del análisis de la CV en ninos infectados por SARS-CoV-2, quienes podrían contribuir a la propagación del virus en la comunidad. Esta preocupación podría extenderse a los trabajadores de la salud que están en contacto con los ninños.

Abstract At present, different reports have shown that children reach similar SARS-CoV-2 viral load (VL) levels compared to adults; however, the impact of VL on children remains ambiguous when asymptomatic versus symptomatic cases are compared. Thus, the aim of this study was to assess VL at the time of diagnosis in asymptomatic and symptomatic SARS-CoV-2 infected children. VL analysis was retrospectively carried out from nasopharyngeal swabs on 82 SARS-CoV-2 infected children, from March to October 2020. Of the 82 children, 31 were asymptomatic. Symptomatic patients had significantly higher VL values compared to asymptomatic ones (median = 7.41 vs4.35 log10 copies/ml, respectively). Notwithstanding, 8 out of 31 asymptomatic children had high VL levels, overlapping levels observed above the first quartile in the symptomatic group. Analysis of different age groups revealed that median VL values were higher in the symptomatic groups, although there was only a significant difference in children younger than 5 years of age. On the other hand, there was no significant difference between the VL values from the 82 SARS-CoV-2 infected children according to age, sex, underlying disease, symptoms or severity of COVID-19 related disease. This study emphasizes the importance of VL analysis in SARS-CoV-2 infected children, who could contribute to viral spread in the community. This concern could be extended to healthcare workers, who are in contact with children.

In the last decade numerous findings have helped to unveil the complex viral-host interactions determining HIV-1 pathogenesis. Viral entry is the first step in the establishment of HIV infection. In this phase, the virus needs to interact with two cellular receptors, the CD4 molecule and a chemokine receptor (mainly CCR5 or CXCR4). Viral envelope features determine the usage of cellular coreceptors thus, virus that use CCR5 or CXCR4 are named R5 and X4, respectively. Viral-coreceptor interactions could be blocked, at least partially, by the CCL3, CCL4 and CCL5 chemokines. Several studies have shown that genetic variations in the chemokines and their receptors may affect HIV-1 transmission and disease progression. In this article the influence of host genetic and viral factors is reviewed as well as our experience in Argentina.

En la última década una serie de descubrimientos ha permitido caracterizar las complejas interacciones virus-hospedador que determinan la patogenia de la infección por el HIV-1. El ingreso del HIV a la célula es el primer paso en el establecimiento de la infección viral. En esta etapa, el virus debe interaccionar con dos tipos de receptores en la superficie celular, el CD4 y un receptor de quimioquina (principalmente CCR5 o CXCR4). La utilización de los co-receptores celulares estará determinada por las características de la envoltura viral, por ello los virus que utilizan el CCR5 o el CXCR4 son denominados R5 y X4 respectivamente. Las interacciones virus - co-receptor como ser R5/CCR5 pueden ser bloqueadas, al menos parcialmente, por las quimioquinas, que son ligandos fisiológicos de los receptores como CCL3, CCL4 y CCL5. Varios estudios han demostrado que variaciones genéticas tanto en los co-receptores como en las quimioquinas pueden condicionar la transmisión del HIV-1 y la evolución de la enfermedad. En este artículo se realiza una revisión de la participación de factores virales y celulares en la inmunopatogenia de la infección por el HIV-1 y de la experiencia de la autora en Argentina.

HIV-1 diagnosis of perinatally exposed children is usually performed by molecular biology-based methods, allowing the direct detection of the virus. Thus, HIV-1 genomic variability within and across strains plays a major role in relation to the sensitivity of these tests, often leading to misdiagnosis. We describe the performance of an in-house multiplex nested PCR (nPCR) for early detection of HIV-1 infection in perinatally exposed children born in Argentina, where the percentage of diverse BF recombinants is as high as 80%. After evaluation of 1316 HIV-1 perinatally exposed children collected over a 7-year period, the specificity and sensitivity of the diagnostic nPCR was of 100% and 99.2% respectively, with only two false negative cases indicating a good performance of the diagnostic nPCR in the Argentine pediatric cohort. In search of unusual HIV-1 subtypes among 22 HIV-1 infected cases presenting partial or complete HIV-1 gene amplification failure, we performed phylogenetic and recombination analysis of a vpu-env fragment in addition to gag and env Heteroduplex Mobility Assay screening. The most unusual findings included two subtypes A and a novel BC recombinant, while the majority of the strains were a variety of different BF recombinants. These results indicate the presence of novel and heterogeneous genotypes in our country and the need of continuous viral surveillance not only for diagnostic test optimization but also for the eventual implementation of a successful vaccine.

El diagnóstico temprano de infección por HIV-1 en niños expuestos perinatalmente al virus se realiza con técnicas de biología molecular, detectando el virus en sangre. Por ello, la variabilidad genómica intra e inter subtipo del HIV-1 juega un rol importante en relación a la sensibilidad de estos tests. Describimos aquí la performance de una PCR multiplex anidada artesanal (nPCR), rutinariamente usada para el diagnóstico temprano de la infección por HIV-1 en niños expuestos por vía perinatal en Argentina, donde cerca del 80% de las cepas circulantes son diversas recombinantes BF. La nPCR se utilizó para el diagnóstico de infección en 1316 niños en un período de 7 años, obteniéndose una especificidad de 100% y una sensibilidad de 99.2%, con sólo 2 falsos negativos. En busca de subtipos inusuales de HIV-1 entre los 22 casos que presentaron falla completa o parcial en la amplificación por nPCR, se subtipificaron fragmentos de gag y env mediante el Ensayo de Movilidad de Heteroduplex, y de los genes vpu-env por análisis filogenético y de recombinación. Se encontraron un subtipo A en 2 hermanos, y una recombinante BC, mientras que el resto de las cepas de HIV-1 pertenecieron a diversas recombinantes BF. Los resultados indican que en nuestro país circula una variedad de genotipos de HIV-1 con influencia sobre el diagnóstico. El continuo monitoreo de las cepas circulantes es necesario tanto para la optimización de las técnicas de diagnóstico como para la implementación de una vacuna efectiva en el futuro.

This study aimed at implementing a Nested-polymerase chain reaction (Nested-PCR) for the molecular diagnosis of human T-cell lymphotropic virus type I/II (HTLV-I and HTLV-II) infections in peripheral blood mononuclear cells of infected subjects in Argentina. The sensitivity and specificity of the assay for the detection of regional strains were assessed by comparing them with the molecular assay of reference PCR-hybridization. The Nested-PCR detected 1 MT-2 cell (³ 8 proviral copies)/1x106 non-infected cells showing high sensitivity for provirus detection. While both molecular assays showed high specificity (100%) for HTLV-I and HTLV-II detection, the sensitivity values differed: 100% for Nested-PCR and 67% for PCR-hybridization assay. Moreover, this technique showed less sensitivity for the detection of DNA sequences of HTLV-II (33%) than for the detection of DNA sequences of HTLV-I (75%). The high sensitivity and specificity of the Nested-PCR for regional strains and its low costs indicate that this assay could replace the PCR-hybridization assay for the molecular diagnosis of HTLV-I/II infections. It will be interesting to assess the usefulness of this assay as a tool for the molecular diagnosis of HTLV-I/II infections in other developing countries. Other studies that include a greater number of samples should be conducted.